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内分泌物在胶束中的增溶作用——材料和方法

来源:Kibron 浏览 57 次 发布时间:2021-09-22

材料


阳离子表面活性剂 HTAB(纯度 > 98.0%)购自 Tokyo Kasei(日本)。 NP(技术级)、hp-β-CD(平均分子量约为 1,540 g mol-1)和罗丹明 B(纯度约为 95%)购自 Sigma-Aldrich。 β-E2(>99% 纯度)购自 Alfa Aesar。 碘化钠(NaI,分析级)和十水硫酸钠(纯度 > 98%)购自 Nacalai Tesque(日本)。 购买来自 Kishida Kagaku(日本)的磷酸二氢钠(> 99.0% 纯度)和来自 Kanto Kagaku(日本)的磷酸氢二钠(> 99.5% 纯度)以制备磷酸盐缓冲溶液(20 mM,pH 7.0)。 所有样品溶液均通过 Millipore 过滤器(Milli-Q Laboratory,Nihon Millipore,Japan,电阻率 18.2 MΩ cm)用纯净水制备。


(HTA)2SO4 的制备


在循环伏安法中,我们使用二十六烷基三甲基硫酸铵 (HTA)2SO4 代替 HTAB,因为溴化物 (Br-) 会干扰伏安图。 HTAB 溶于乙醇和 1.2 当量。 加入硫酸银以沉淀出溴化银晶体形式的 Br−。 通过过滤从溶液中除去溴化银。 然后,蒸发(HTA) 2 SO 4 的乙醇溶液并将干燥的盐溶解在甲醇中。 溶解的盐用丙酮重结晶两次。 过滤最终的晶体并在真空干燥器中干燥。


方法


界面张力 (γ) 测量


使用了两种类型的界面张力计。 一种是悬滴式界面张力计(PD-X 型,配有 FAMAS 1.7.0 版软件,日本协和界面科学公司)。 一滴样品悬浮在 18 号不锈钢针上。 液滴周围的水套通过循环水浴(模型 RTE-5,Neslab,美国)恒温在 25.0±0.1°C。 在液滴形成后超过 5 分钟记录所有数据。 还使用了 Du Nong 型界面张力计(Model AquaPi & EZ-Pi,Kibron,Finland)。 将该张力计放置在湿度保持较高且水温为24°C的箱体中。 在读数变得恒定后记录所有数据。 这些仪器用纯水校准。 所有测量均在平衡 1 小时后进行。


荧光各向异性测量 所有荧光各向异性测量均在 BEACON 2000 光谱仪 (Pan Vera) 上在 25.0±0.1 °C 下进行。 该设备配备了一个 100-W 卤素灯作为激发源和一个装有循环水浴以控制温度的恒温电池室。 罗丹明 B (RB) 被用作荧光探针 [10]。 通过分别使用 570 和 630 nm 的激发和发射波长测量荧光各向异性。 发射狭缝和激发狭缝的尺寸均为 10 nm。 RB 的浓度保持在 0.1 μM。 RB 有望在胶束的表面区域增溶并报告有关那里微观结构变化的信息。 分子探针荧光发射的去极化程度是其在激发寿命期间的旋转扩散的量度。 稳态各向异性 (r) 通过 Perrin 方程与探针周围的粘度有关:



其中 r0 是在没有旋转自由的情况下获得的发射各向异性的极限值,C 是荧光团激发态的平均寿命,T 是绝对温度,k 是玻尔兹曼常数,V 是探针的有效分子体积, η 是探头周围的粘度。 从 Perrin 方程可以看出,较大的各向异性对应于固定温度下更加刚性的环境。 获得的极化值 (P) 通过以下等式转换为 r 值:



胶束介质中探针RB的各向异性值取10次读数的平均值。


DLS


对于动态光散射 (DLS) 测量,使用了高性能粒度仪(HPPS 型,马尔文,英国)。 激发源是 633 nm 的 He-Ne 激光。 散射角选择为 173°,以减少多次散射。 每次测量都使用光程为 1 厘米的一次性塑料比色皿。 温度保持在25.00±0.01℃。 所有数据均在试管设置后 10 分钟记录,并作为十次测量的积云。 胶束值的流体动力学半径(RH)取三个读数的平均值。


循环伏安法测量


在胶束溶液中研究了 I2/I− 的电极反应。 铂圆盘电极(BAS,φ=1.6 mm)作为工作电极,银-氯化银电极作为参比电极,铂丝作为对电极。 每次扫描均在工作电极用铝粉(0.3 μm)抛光并用纯水冲洗后进行。 所有样品溶液都含有 0.49 M 硫酸钠和 0.01 M 硫酸作为支持电解质。 使用微分恒电位仪(型号 HECS-310B,Huso,日本)。 碘化钠的浓度恒定在 0.5 mM。 每次扫描在 10 mV s-1 下进行。 记录含有 hp-β-CD 的碘化钠溶液在不存在和存在 10 分钟氩气通气情况下的循环伏安图 (CV)。 未观察到溶解氧对 CV 的影响(图中未显示)。 因此,所有 CV 均在没有氩气曝气预处理的情况下进行。


内分泌物在胶束中的增溶作用——摘要、介绍

内分泌物在胶束中的增溶作用——材料和方法

内分泌物在胶束中的增溶作用——结果和讨论

内分泌物在胶束中的增溶作用——结论、致谢!

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