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香豆素和磷脂混合物单分子层膜中的分子相互作用的界面性质——材料和方法

来源:上海谓载 浏览 289 次 发布时间:2021-11-01

二、材料和方法


2.1. 材料


香豆素 (99% 纯度), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphorac-(1-glycerol), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanola 我的和 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine(所有 纯度 > 99% 的磷脂)购自 Sigma– 奥尔德里奇(美国圣路易斯)。 超纯水 (18.2 ΩX.cm-1 次方) 是 从 Synergy Milli-Q 系统 (Billerica, USA) 获得。


2.2.π-A 和 ∆VA 等温线


CMR 和脂质溶液在氯仿中制备,浓度为 1 mg.mL-1。 随后,CMR/的不同解决方案 不同摩尔比的脂质 (XCMR = 0, 0.250, 0.375, 0.500, 0.675, 获得了 0.750、0.875 和 1)。 然后,这些馏分的 10 mL 均匀地沉积在柠檬酸盐(柠檬酸)-磷酸盐上 (磷酸钠) 缓冲液 (pH 7.4 和离子强度 10-3 次方 M) 亚相 (v = 20 毫升) 使用汉密尔顿微移液器。 实验 在恒定的对称压缩下进行 速度15mm.min-1次方(温度23±0.2圈),等待后 15 分钟以确保溶剂蒸发。 等温线在 Kibron Langmuir 槽(Microtrough XS,Helsinki, 芬兰)。 表面压力测量精度为 ±0.01 mN.m-1次方 . 通过振动测量表面电位 板法(Microspot,Kibron,赫尔辛基,芬兰),精度为 ±0.1 mV。π-A 和 ΔVA 等温线重复三次,标准偏差约为 5%,使用至少三个 不同的解决方案。


2.3. LB薄膜的形态分析


纯单层和混合单层被压缩并保持在 p = 20 mN.m-1 次方的目标压力下 . 随后,Langmuir 薄膜被转移到新切割的云母上,浸渍 基板以 2 mm.min-1 次方的恒定速率以控制 单层的形成。 所有测量均使用 SPM 9700 原子力显微镜(Shimadzu 仪器有限公司,日本)在非接触模式。 悬臂与 一个硅原子力显微镜探头(Nanoworld,日本,共振频率 = 300 kHz,弹簧常数 = 42 Nm-1次方 ) 被使用。 图片 (512 每行点)以 1.0 Hz 的扫描速率在一次扫描中收集 面积 5.0 ? 5.0 mm 在每个样品的四个不同区域上的至少两个不同样品上此外,还获得了图像 并使用 AFM Gwyddion 软件 (Necas, 2008) 进行分析。


香豆素和磷脂混合物单分子层膜中的分子相互作用的界面性质——摘要、简介

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